北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
培養(yǎng)基 | 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃) |
傳代方法 | ①溶解:向質(zhì)粒干粉中加入20μL無菌水進(jìn)行溶解,室溫靜置1min; ②混合:取50μl 感受態(tài)細(xì)胞與10μl 質(zhì)粒 DNA 混勻,冰上放置 30min; ③熱激導(dǎo)入:42℃靜置 90s; ④收縮膜孔:冰浴 2min; ⑤修復(fù)培養(yǎng):毎管加 800μl 液體培養(yǎng)基,37 ℃搖床培養(yǎng)1h(150 r/min); ⑥篩選培養(yǎng):將適當(dāng)體積(100 μl)的復(fù)蘇細(xì)胞,涂布在相應(yīng)抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(瓊脂面務(wù)必干燥后), 倒置培養(yǎng) 12-16h,出現(xiàn)菌落; ⑦提?。禾羧慰寺【渲料鄳?yīng)抗性 LB 液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng) 12-16h,根據(jù)試驗(yàn)需要提取質(zhì)粒 |
生長條件 | 37℃;18-24h;好氧 |
存儲(chǔ)條件 | -20℃ |
安全等級(jí) | 1 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 質(zhì)粒載體 |
共享方式 | 公益性共享 |
證書下載 | 說明書文件 |
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